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色譜柱的技術發展與展望
更新時間:2018-03-19   點擊次數:3135次

    伴(ban)隨著生命科(ke)學、醫藥學及(ji)(ji)環境(jing)、食品(pin)安全等(deng)領域的(de)(de)強勁需(xu)求與(yu)(yu)發(fa)展(zhan)(zhan),已很(hen)成熟(shu)的(de)(de)HPLC技術(shu)(shu)獲得了(le)新的(de)(de)推(tui)動力(li),面(mian)臨著新的(de)(de)挑戰和(he)發(fa)展(zhan)(zhan)機遇。這些(xie)新的(de)(de)需(xu)求可歸納為(wei):更(geng)(geng)高(gao)的(de)(de)分(fen)(fen)離(li)效率、更(geng)(geng)快的(de)(de)分(fen)(fen)離(li)速(su)度、更(geng)(geng)好(hao)的(de)(de)化(hua)學穩定(ding)性、更(geng)(geng)大(da)的(de)(de)峰容量和(he)更(geng)(geng)適宜的(de)(de)分(fen)(fen)離(li)模式(shi)。此外,針(zhen)對(dui)痕量樣品(pin)的(de)(de)分(fen)(fen)離(li)分(fen)(fen)析,對(dui)檢(jian)測靈敏度也提出了(le)更(geng)(geng)高(gao)的(de)(de)需(xu)求。面(mian)對(dui)這些(xie)挑戰與(yu)(yu)需(xu)求,作為(wei)色(se)譜儀(yi)和(he)色(se)譜技術(shu)(shu)核(he)心的(de)(de)色(se)譜柱(zhu),近(jin)年來(lai)發(fa)展(zhan)(zhan)迅速(su),取得了(le)更(geng)(geng)顯著的(de)(de)發(fa)展(zhan)(zhan)。近(jin)年來(lai),色(se)譜技術(shu)(shu)的(de)(de)新進(jin)展(zhan)(zhan)主要包括(kuo):細(xi)粒(li)徑填料(liao)(liao)及(ji)(ji)色(se)譜柱(zhu)、超(chao)純(chun)硅膠基(ji)質及(ji)(ji)高(gao)化(hua)學穩定(ding)性填料(liao)(liao)、整體柱(zhu)技術(shu)(shu)、親水作用色(se)譜柱(zhu)等(deng)。

  針對、快速(su)(su)、高(gao)(gao)通(tong)量的(de)(de)要(yao)求,細粒(li)徑填(tian)料(liao),特(te)別是亞2微米(mi)(mi)尺(chi)度硅膠基質填(tian)料(liao)取得(de)了(le)長足(zu)的(de)(de)發展,并直(zhi)接催生了(le)超(chao)(chao)也是超(chao)(chao)高(gao)(gao)壓色譜(pu)系(xi)統(tong)的(de)(de)出現。早(zao)在2005年Waters公司向(xiang)市場推(tui)出了(le)UPLC系(xi)統(tong),所(suo)使用(yong)的(de)(de)1.7?m的(de)(de)雜化型(xing)填(tian)料(liao);嗣(si)后(hou),日本分光、安捷(jie)倫、珀(po)金埃(ai)爾默、島津、戴安等公司也相繼推(tui)出了(le)相應的(de)(de)超(chao)(chao)效或超(chao)(chao)快液相系(xi)統(tong)。這些(xie)系(xi)統(tong)均使用(yong)了(le)亞2微米(mi)(mi)填(tian)料(liao)或2微米(mi)(mi)填(tian)料(liao)填(tian)裝的(de)(de)柱(zhu)子(zi)。但是,根據色譜(pu)動力(li)學理論可(ke)知,柱(zhu)子(zi)所(suo)需壓力(li)將(jiang)隨(sui)粒(li)徑減小呈平方增長,此外,由于*線速(su)(su)度與(yu)粒(li)徑成(cheng)反(fan)比,此時,若要(yao)得(de)到(dao)*流速(su)(su),還必須(xu)(xu)提高(gao)(gao)流速(su)(su)。綜合考慮兩個(ge)因(yin)素,柱(zhu)壓降將(jiang)與(yu)粒(li)徑的(de)(de)三次方成(cheng)反(fan)比。因(yin)此,為取得(de)高(gao)(gao)柱(zhu)效就必須(xu)(xu)大幅提高(gao)(gao)流動相的(de)(de)驅動壓力(li)。

  傳統的(de)(de)以(yi)硅(gui)膠為基(ji)質的(de)(de)HPLC填料,因其本身(shen)性質的(de)(de)局(ju)限以(yi)及殘余(yu)硅(gui)羥基(ji)和雜質金屬(shu)離(li)子的(de)(de)影響,存在對極性溶質的(de)(de)非特異(yi)性吸(xi)附和化學穩定(ding)性較(jiao)差的(de)(de)問題(ti)(ti)。此(ci)問題(ti)(ti),可從(cong)三方面入手(shou)加以(yi)解決:一是采用超純硅(gui)膠基(ji)球(qiu),二(er)是采用特殊的(de)(de)鍵合試劑和反(fan)應控制方法(fa),三是發展聚合基(ji)質填料。目前,這一問題(ti)(ti)已(yi)經(jing)得到了較(jiao)好的(de)(de)解決。

  整(zheng)體(ti)(ti)柱(zhu)(zhu)(monolithic column)是用原位(wei)聚(ju)合和類(lei)似澆鑄的(de)方法(fa)制備(bei)的(de)整(zheng)體(ti)(ti)、連續的(de)柱(zhu)(zhu)體(ti)(ti)組裝的(de)色譜柱(zhu)(zhu)。整(zheng)體(ti)(ti)柱(zhu)(zhu)具有雙孔(kong)結構,即(ji)同時具有微米級的(de)大孔(kong)和納米級的(de)小孔(kong),因(yin)此(ci)(ci),柱(zhu)(zhu)子具有較高的(de)柱(zhu)(zhu)效但柱(zhu)(zhu)壓卻(que)很低,H-u曲線(xian)也較平坦。此(ci)(ci)外,由于基質的(de)純度(du)很高,使得這種整(zheng)體(ti)(ti)柱(zhu)(zhu)的(de)化學穩定性亦很好。因(yin)此(ci)(ci),人們普遍對其給予(yu)厚(hou)望。但是,整(zheng)體(ti)(ti)柱(zhu)(zhu)柱(zhu)(zhu)間重現(xian)性問題限制了其更廣泛(fan)的(de)應用,是一個亟待解(jie)決的(de)難題。

  生(sheng)物(wu)(wu)醫(yi)藥色譜(pu)(pu)中往往需要面(mian)對強(qiang)極(ji)性(xing)化(hua)合物(wu)(wu)的分(fen)離(li)問題,但常(chang)用的反相色譜(pu)(pu)對強(qiang)極(ji)性(xing)化(hua)合物(wu)(wu)如糖(tang)及糖(tang)綴合物(wu)(wu)、糖(tang)肽等的分(fen)離(li)幾乎(hu)無(wu)能為力,故而(er)(er)(er)迫切需要發展新的色譜(pu)(pu)分(fen)離(li)模式(shi)。親水作用色譜(pu)(pu)(HILIC)應運而(er)(er)(er)生(sheng)。此(ci)外(wai),石(shi)墨化(hua)碳(tan)柱因其特殊的選擇性(xing)而(er)(er)(er)適用于強(qiang)極(ji)性(xing)物(wu)(wu)質(zhi)(zhi)的分(fen)離(li)。混(hun)合模式(shi)柱或表面(mian)嵌入極(ji)性(xing)基團的方法(fa)也(ye)可以使其可同時分(fen)離(li)極(ji)性(xing)和非極(ji)性(xing)物(wu)(wu)質(zhi)(zhi),在用途上和HILIC具有(you)類似性(xing)。

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