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液相色譜柱的使用注意事項
更新時間:2018-10-26   點擊次數:7865次

1、 色譜柱的使用說明:

        (1)、色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)柱使(shi)用前注(zhu)意事項:色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)柱的(de)(de)儲(chu)存(cun)液無特殊說明,均(jun)為評價報告所(suo)示的(de)(de)流(liu)動相。在使(shi)用前,一定要注(zhu)意色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)柱的(de)(de)儲(chu)存(cun)液與要分(fen)析樣品的(de)(de)流(liu)動相是否互溶(rong)。在反(fan)相色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)中,如用高(gao)濃(nong)度(du)的(de)(de)鹽或緩(huan)沖(chong)液作洗脫(tuo)劑(ji),應先用10%左(zuo)右的(de)(de)低濃(nong)度(du)的(de)(de)有機(ji)相洗脫(tuo)劑(ji)過(guo)渡一下,否則緩(huan)沖(chong)液中的(de)(de)鹽在高(gao)濃(nong)度(du)的(de)(de)有機(ji)相中很容易析出,堵塞色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)柱。

         (2)、流(liu)動(dong)(dong)(dong)(dong)相(xiang):流(liu)動(dong)(dong)(dong)(dong)相(xiang)中(zhong)(zhong)所(suo)(suo)使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)各種有(you)機溶(rong)劑要盡可能使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)色(se)譜純(chun),配(pei)(pei)流(liu)動(dong)(dong)(dong)(dong)相(xiang)的(de)(de)(de)水是超純(chun)水或全玻(bo)璃器(qi)皿的(de)(de)(de)雙(shuang)蒸水。如果將(jiang)所(suo)(suo)配(pei)(pei)得流(liu)動(dong)(dong)(dong)(dong)相(xiang)再經過(guo)0.45μm的(de)(de)(de)濾膜過(guo)濾一次(ci)則更好,尤其(qi)是含(han)鹽的(de)(de)(de)流(liu)動(dong)(dong)(dong)(dong)相(xiang)。另外,裝(zhuang)流(liu)動(dong)(dong)(dong)(dong)相(xiang)的(de)(de)(de)容器(qi)和色(se)譜系統中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)在(zai)線過(guo)濾器(qi)等裝(zhuang)置(zhi)應(ying)該定期清洗(xi)或更換。以(yi)常(chang)規硅膠為基質的(de)(de)(de)鍵合(he)(he)相(xiang)填料通常(chang)的(de)(de)(de)PH值適(shi)用(yong)(yong)(yong)范(fan)圍(wei)是2.0-8.0,BDS C18適(shi)合(he)(he)于(yu)(yu)堿性化合(he)(he)物,PH值適(shi)用(yong)(yong)(yong)范(fan)圍(wei)為2.0-10.0。當(dang)必須要在(zai)PH值適(shi)用(yong)(yong)(yong)范(fan)圍(wei)的(de)(de)(de)邊界條件下使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)色(se)譜柱時,每次(ci)使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)結束后立即用(yong)(yong)(yong)適(shi)合(he)(he)于(yu)(yu)色(se)譜柱儲存并與所(suo)(suo)使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)流(liu)動(dong)(dong)(dong)(dong)相(xiang)互溶(rong)的(de)(de)(de)溶(rong)劑清洗(xi),并*置(zhi)換掉原來所(suo)(suo)使(shi)(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)流(liu)動(dong)(dong)(dong)(dong)相(xiang)。  

        (3)、樣(yang)(yang)品(pin)(pin):樣(yang)(yang)品(pin)(pin)也要(yao)盡(jin)可能清潔,可選用(yong)(yong)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)過濾器(qi)或(huo)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)預處理柱(SPE)對(dui)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)進行(xing)預處理;若(ruo)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)不(bu)便處理,要(yao)使(shi)用(yong)(yong)保護柱。在用(yong)(yong)正相(xiang)色(se)譜法分析樣(yang)(yang)品(pin)(pin)時(shi),所有的溶劑(ji)和樣(yang)(yang)品(pin)(pin)應嚴格脫水。

         2、 色譜柱的保存

        (1)、反相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)柱每天實(shi)驗(yan)后的保養:使用緩沖(chong)液或含鹽的流動(dong)相(xiang)(xiang),實(shi)驗(yan)完成(cheng)后應(ying)用10%的甲醇(chun)/水沖(chong)洗30分鐘,洗掉色(se)譜(pu)柱中的鹽,再用甲醇(chun)沖(chong)洗30分鐘。注(zhu)意:不能用純水沖(chong)洗柱子(zi),應(ying)該(gai)在水中加入(ru)10%的甲醇(chun),防止(zhi)將填料沖(chong)塌陷。

       (2)、長期保存色譜(pu)(pu)(pu)柱:如色譜(pu)(pu)(pu)柱要長時間保存,必須(xu)存于(yu)(yu)合適的(de)溶劑下(xia)。對于(yu)(yu)反相柱可以儲(chu)存于(yu)(yu)純(chun)甲醇(chun)或乙(yi)腈中(zhong)(zhong),正相柱可以儲(chu)存于(yu)(yu)嚴(yan)格脫水后的(de)純(chun)正己烷中(zhong)(zhong),離子交(jiao)換柱可以儲(chu)存于(yu)(yu)水(含防腐劑疊dan化(hua)鈉 )中(zhong)(zhong),并將購買新色譜(pu)(pu)(pu)柱時附送的(de)堵(du)(du)頭堵(du)(du)上。儲(chu)存的(de)溫度是室溫。

         3、 色譜柱的再生因為色譜柱是消耗品,隨著使用時間或進樣次數的增加,會出現色譜峰高降低,峰寬加大或出現肩峰的現象,一般來說可能是柱效下降。

       (1)、反(fan)相(xiang)柱的(de)再生:依次采用(yong)20-30倍的(de)色(se)譜(pu)(pu)柱體(ti)積的(de)甲醇(chun)(chun):水=10:90 (V/V),乙腈,異丙醇(chun)(chun)作(zuo)為(wei)流動相(xiang)沖(chong)洗色(se)譜(pu)(pu)柱,完成后再以(yi)相(xiang)反(fan)順序沖(chong)洗色(se)譜(pu)(pu)柱。

       (2)、正(zheng)相柱的再生:依次以20-30倍(bei)色譜柱的體積的正(zheng)己烷、異丙醇(chun)、二氯甲烷、甲醇(chun)作為流動相沖洗色譜柱,然后(hou)再以相反的順序沖洗色譜柱。要注(zhu)意上(shang)述溶劑必須嚴格脫(tuo)水。

          4、 色譜柱在使用過程中易出現的問題和解決辦法

         色(se)譜柱在使用中(zhong)zui常(chang)見(jian)的(de)問題就是(shi)柱壓升(sheng)高(gao)(gao),如(ru)果柱壓是(shi)在長時間使用過程(cheng)中(zhong)緩慢(man)增加,屬于正常(chang)現象。但柱壓在使用過程(cheng)中(zhong)突然升(sheng)高(gao)(gao)(系統管(guan)路堵塞及(ji)壓力傳感器故障除外(wai)),可(ke)能(neng)的(de)原因有如(ru)下(xia)幾點:

        (1)、色譜柱頭的(de)過(guo)濾篩板(ban)堵塞或(huo)污染;

        (2)、色譜柱(zhu)頭(tou)的填料(liao)被樣(yang)品污染;

        (3)、色譜柱(zhu)內(nei)緩沖液中的鹽遇(yu)到高濃度(du)的甲醇或(huo)其(qi)他(ta)有機溶劑,形成結晶析出;

        (4)、流(liu)動相(xiang)PH值過(guo)大或(huo)過(guo)小使固(gu)定相(xiang)結構(gou)破壞或(huo)溶解。

          解決辦法如下:

          (1)、如確定(ding)是色(se)譜(pu)柱(zhu)頭的(de)過濾篩板被(bei)污染,可以將(jiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)反(fan)方向用甲醇沖(chong)洗至(zhi)正常(chang)壓力,或者卸下色(se)譜(pu)柱(zhu)頭,將(jiang)其放(fang)在(zai)10%的(de)稀硝酸內(nei)超聲清(qing)洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色(se)譜(pu)柱(zhu)。

          (2)、如確定色(se)譜柱(zhu)頭的(de)填料被(bei)污染,將(jiang)柱(zhu)頭螺絲(si)卸下,挖出柱(zhu)內前段被(bei)污染的(de)填料,用相(xiang)同的(de)柱(zhu)填料重新填入,仔細修(xiu)復(fu)后,重新安裝(zhuang)上(shang)柱(zhu)頭螺絲(si)。

         (3)、如確定定是鹽結晶,用10%的甲醇/水沖(chong)洗色譜柱使柱內鹽全部溶解(jie),再換高(gao)濃度甲醇。

         (4)、如(ru)果(guo)因PH值使用不(bu)當(dang),很難恢(hui)復。 

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